烟草转化-贝科新肽科技公司
玉米基因转化原理玉米基因转化的逻辑是外源基因递送—基因组整合——稳定遗传表达。利用生物介导或物理化学手段,将携带目的基因的外源DNA片段导入玉米受体细胞,通过DNA同源重组或随机整合机制,使外源基因稳定嵌入玉米核基因组;再通过植物组织培养技术,将转化后的单细胞、愈伤组织或幼胚再生为完整植株,终筛选获得可稳定遗传外源性状的玉米株系。与模式植物拟南芥不同,玉米属于单子叶禾本科作物,自然状态下难以被农杆菌侵染,且愈伤组织分化、再生难度高、基因型依赖性强,因此需要针对性优化转化载体、侵染体系与组培方案,才能实现转化。基因轰击法(微粒轰击法)纯物理转化技术,不依赖农杆菌生物侵染体系,是水稻早期研究的方法,目前仅作为特殊实验的辅助手段。1.机制将重组质粒DNA包裹于金粉、钨粉微米级微粒表面,通过基因高压加速微粒,穿透水稻细胞壁与细胞膜,将外源DNA送入细胞核,随机整合至水稻基因组中,烟草转化,实现基因转化。2.适用场景适配农杆菌侵染困难的特殊籼稻基因型、水稻悬浮细胞、原生质体;可用于多基因共转化、基因编辑载体瞬时表达、细胞器基因转化等特殊实验场景。农杆菌侵染与共培养将活化的农杆菌菌液调配至适宜OD值,将筛选后的胚性愈伤浸入菌液浸泡侵染,适度震荡保证菌液充分附着;捞出愈伤吸干表面多余菌液,接种于共培养基,25℃避光暗培养2–3天,完成T-DNA的转移与基因组整合。4.抗性筛选与愈伤继代共培养结束后,用无菌水洗脱愈伤表面残留农杆菌,吸干水分后转入含对应筛选剂的筛选培养基,28℃避光培养。经过2–3轮继代筛选,淘汰未转化的阴性愈伤,获得增殖状态良好的抗性阳性愈伤组织。烟草转化-贝科新肽科技公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司拥有很好的服务与产品,不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员,点击页面的商盟客服图标,可以直接与我们客服人员对话,愿我们今后的合作愉快!)