植株分化与生根培养将阳性胚性愈伤转入分化培养基，光照条件下培养，诱导芽体分化、幼苗生长；待幼苗长至3–5cm、具备完整茎叶结构后，转入生根培养基诱导根系生长，培系发达、长势健壮的完整组培苗。炼苗移栽与分子鉴定打开组培瓶封口膜，室内炼苗3–5天，适应外界温湿度环境后，清洗根部培养基残渣，移栽至温室大田培养，获得T0代植株。提取植株基因组DNA，通过PCR、荧光定量PCR、Southern杂交鉴定外源基因整合与表达情况；收获T1及后代种子，连续自交筛选，获得遗传稳定的纯合株系。载体构建与菌株活化根据实验需求构建植物表达载体，将目的基因、特异性启动子、终止子、抗性筛选标记（潮抗性、草铵抗性为水稻常用筛选标记）插入二元载体T-DNA区域，测序验证序列无误后，将重组载体导入EHA105等农杆菌感受态细胞，筛选阳性单菌落，活化备用。2.水稻愈伤组织诱导选取饱满无破损的水稻成熟种子，去除外壳，经过酒精、次梯度无菌消毒后，接种于愈伤诱导培养基。26–28℃避光暗培养2–3周，大豆基因转化，诱导种子盾片产生淡黄色、颗粒状、致密的胚性愈伤组织，剔除褐化、水渍化的无效愈伤，挑选胚性愈伤作为转化受体。受体材料制备选取授粉后10–14天的玉米雌穗，剥离幼嫩籽粒，无菌条件下分离长度1.5–2.0mm的未成熟合子胚，去除胚轴，备用为转化受体。该时期幼胚分生能力，转化与再生效率。3.农杆菌侵染与共培养将制备好的玉米幼胚浸入活化后的农杆菌侵染液，辅以短时离心、负压处理提升侵染效率；吸干多余菌液后，将幼胚置于共培养基上，22–25℃避光暗培养2–3天，实现T-DNA的转移与整合。大豆基因转化-贝科新肽由武汉贝科新肽科技有限公司提供。行路致远，砥砺前行。武汉贝科新肽科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴，更矢志成为化学试剂具有竞争力的企业，与您一起飞跃，共同成功!)