侵染与共培养农杆菌菌液调至OD600=0.6–0.8，愈伤浸泡侵染10–20min，轻微震荡；侵染后捞出愈伤，无菌滤纸吸干表面所有菌液（积水是褐化、菌污染主要原因）。平铺于共培养基，25℃暗培养2–3天，以愈伤表面微微出现薄层菌膜为状态。抗性筛选与继代共培养结束后，大豆组培，无菌水洗去表面农杆菌，可低浓度水洗一次，吸干水分后接种筛选培养基。首轮筛选14天后，剔除褐化、愈伤，将新生嫩黄抗性愈伤切下继代。连续2–3轮筛选，去除假阳性与残留农杆菌，获得纯净阳性愈伤群体。其他辅助转化技术PEG介导原生质体转化法：通过PEG试剂诱导外源DNA与水稻原生质体融合，多用于瞬时表达实验、蛋白亚细胞定位、基因互作验证，无法获得稳定遗传植株。花粉管通道法：利用水稻授粉后花粉管通道未愈合的窗口期，直接滴加外源质粒DNA，操作简单、无需组培，但转化效率极低、重复性差，仅用于简易种质创制。三、水稻基因转化完整操作流程以科研常用、体系成熟的农杆菌介导水稻成熟种子愈伤转化体系为例，标准化流程分为载体构建、愈伤诱导、侵染共培养、筛选再生、炼苗移栽、分子鉴定六大步骤。玉米基因转化完整操作流程以的农杆菌介导玉米幼胚转化体系为例，完整流程分为载体构建、受体制备、侵染转化、筛选再生、阳性植株鉴定五大步骤。1.载体构建根据实验需求构建植物表达载体，将目的基因、启动子、终止子、抗性筛选标记基因（如除草剂抗性、抗性）插入二元载体T-DNA区域，测序验证无误后，将重组载体导入农杆菌感受态细胞，筛选阳性农杆菌菌株备用。大豆组培-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是湖北武汉,化学试剂的见证者，多年来，公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针，满足客户需求。在贝科新肽领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈，共创贝科新肽更加美好的未来。)