新兴检测技术中，表面增强拉曼光谱（SERS）技术凭借超灵敏、高特异性、可多元检测的优势，成为外泌体检测的研究热点，可实现外泌体浓度、表面表型、膜内物质的检测，在临床医学诊断中展现出良好的应用前景，截至2024年10月，近十年相关研究已累计发表213篇，引用量达4051次，体现了该技术的快速发展与巨大潜力。此外，CRISPR-Cas12a耦合微流控平台可实现10种miRNA并行分析，检测限低至10?1?mol/L；“适体-纳米孔”技术可同步捕获外泌体PD-L1蛋白与let-7amiRNA，揭示免疫逃逸机制；纳米材料传感器（如石墨烯场效应管）具有信号放大效应强、检测范围宽等优势，检测范围可达103~1012particles/mL。随着外泌体研究的不断升温，外泌体提取，电镜技术也在持续优化和创新，从传统的负染成像到冷冻成像、3D重构，从单一的形态观察到结构与功能的联合分析，电镜技术为外泌体的研究提供了越来越强大的技术支撑。然而，外泌体电镜研究仍面临诸多挑战，如样本制备复杂、易产生伪影、成像结果解读困难、技术流程未标准化等，这些问题严重影响了研究结果的准确性和可重复性，限制了外泌体基础研究向临床应用的转化。因此，系统梳理外泌体电镜技术的原理、流程、应用及现存问题，对于推动外泌体研究的规范化、标准化发展，挖掘外泌体的生物学功能及临床应用价值具有重要的理论意义和实践价值。本文结合近年来的研究进展，对上述内容进行、详细的阐述，为相关领域研究人员提供参考。主流电镜技术与流程传统透射电镜（负染TEM，常用）样品制备：纯化外泌体悬液（离心+0.22μm过滤），滴至Formvar/碳膜铜网吸附（5–30min）；2%预固定，再用1–2%醋酸铀（UA）或2%磷钨酸（PTA，pH6.5–7.0）负染（0.5–2min），吸干后室温干燥。成像参数：加速电压80–120kV，放大倍数50，000–100，000×，低剂量模式避免样品损伤。典型图像：双层膜清晰，呈亮边暗背景的杯状/圆形，直径符合30–150nm范围；盐结晶为规则几何形、细胞碎片不规则，需排除。外泌体提取-武汉贝科新肽公司(图)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是一家从事“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，稳健经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上，用户至上”的原则，使贝科新肽在化学试剂中赢得了客户的信任，树立了良好的企业形象。特别说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！)