原位杂交第二天1.1）将探针回收，放于－20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。4）置换0.2XSSCT1ml，60℃，原位杂交检测，放置30分钟，重复一次。2.1）用MABT洗两次，植物原位杂交，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。2）室温下加1ml1：2：7溶液，时间为一小时。3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4C冰箱过夜。原位杂交技术的原理是什么？有何用途原位杂交技术的原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列，将有性或非性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，染色体荧光原位杂交，经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列要具备3个重要条件：组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜（1）在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/LNaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，将滤膜放到小洼上，展平保鲜膜，使滤膜均匀湿润，让滤膜留于原处2-3分钟。（2）用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜，用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/LNaOH重复步骤（1）。（3）吸干滤膜，湖北原位杂交，将滤膜转移到新的带有1mol/LTris·Cl(pH7.4）的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜，再重复一次该步骤。（4）吸干滤膜，把它转移到有1.5mol/LNaCl、0.5mol/LTris·Cl(pH7.4）的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜，转移到一张干的滤纸上，置于室温20-30分钟，使滤膜干燥。（5）将滤膜夹在两张干的滤纸之间，在真空烤箱中于80℃干烤2小时，固定DNA。（6）将固定在膜上的DNA与32P标记的RNA进行杂交。湖北原位杂交-武汉贝科新肽公司-染色体荧光原位杂交由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司实力不俗，信誉可靠，在湖北武汉的化学试剂等行业积累了大批忠诚的客户。贝科新肽带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)