外泌体电镜是纳米级外泌体（直径通常30–150nm）形态鉴定与结构分析的技术，主流为透射电镜（TEM，含负染、超薄切片）、冷冻透射电镜（Cryo-TEM），辅以扫描电镜（SEM）和电子断层扫描（ET），是外泌体“金标准”鉴定方法之一（常与NTA、Westernblot联用）。常用技术与流程负染TEM（常规）原理：用2%磷钨酸（PTA，pH6.5–7.0）或醋酸双氧铀染背景，样品本身不被强染，形成亮边暗中心的反差，清晰显示双层膜与杯状/茶托形态。流程：碳支持膜铜网滴样（5–10μL，静置10min吸附）→滤纸侧吸余液→负染1–2min→吸干晾干→80–120kV、50k–100k倍观察。优点：快速、成本低、样品需求量小；缺点：化学染色可能轻微改变结构，盐结晶易干扰。冷冻透射电镜（cryo-TEM）无需化学固定与染色，将样品快速浸入液态玻璃化冷冻，在液氮温度下成像；能保留外泌体天然结构（膜、内部成分），适合高分辨率三维重构（冷冻电子断层扫描cryo-ET）；缺点是设备昂贵、样品制备门槛高。超薄切片TEM外泌体经/双固定、脱水、树脂包埋后，切成40–90nm超薄切片，染色后观察；适合观察细胞内多囊体释放外泌体的原位结构，或外泌体群体的内部细节。扫描电镜（SEM）电子束扫描样品表面成像，主要看外泌体在基底上的分布与表面形貌；需喷金导电处理，分辨率略低于TEM，不适合观察内部膜结构。与扫描电镜不同，TEM需要将样品制备成超薄切片（厚度通常为50~100nm）或直接将纳米级样品吸附在载样网上，确保电子束能够穿透样品。对于外泌体样品，外泌体WB测试，通常采用负染法或正染法进行染色处理，以增强样品与背景的对比度，便于观察外泌体的形态和结构——负染法是利用高电子密度的重金属盐（如磷钨酸、醋酸铀）包裹外泌体表面，使背景呈现深色，外泌体呈现亮白色的“亮核暗晕”形态；正染法则是让重金属盐渗透到外泌体内部，使外泌体呈现深色的“暗核亮背景”形态，两种染色方法各有优势，可根据研究需求选择使用。外泌体WB测试-贝科新肽(推荐商家)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”选择武汉贝科新肽科技有限公司，公司位于：湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号，多年来，贝科新肽坚持为客户提供好的服务，联系人：夏先生。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。贝科新肽期待成为您的长期合作伙伴！)