和其它实验方法一样，必须同时设对照试验以证明其实验结果特异性。对照试验的设置须根据核酸探针和靶核苷酸的种类和现有的可能条件去选定。ISHH的优点是它的高度特异性，它可测定组织、培养的单个细胞或细胞提取物中的核苷酸含量。应用高敏感度的性标记cRNA探针在理想的ISHH的实验条件下检测mRNA，其敏感度可达到20个mRNA拷贝/每个细胞。由于双链DNA的稳定性，在用ISHH定位DNA时很少发生丢失，原位杂交，降解，其敏感性高到能够显示在染色体铺片上，有时甚至在组织切片上的单个基因拷贝。正因为如此，对ISHH结果的解释应持慎重态度，荧光原位杂交，特别是前人未报告过的新发现。以菌落原位杂交为例：对分散在若干个琼脂平板上的少数菌落（100-200）进行筛选时，可采用该方法。将这些菌落归并到一个琼脂主平板以及已置于第二个琼脂平板表面的一张纤维素滤膜上。经培养一段时间后，植物染色体原位杂交，对菌落进行原位裂解。主平板应贮存于4℃直至得到筛选结果。将少数菌落转移到纤维素滤膜上（1）在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。（2）用无菌牙签将各个菌落先转移至滤膜上，再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种（或打点）。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后，在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。（3）倒置平板，于37℃培养至划线的细菌菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。（4）用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂，在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。（5）用Parafilm膜封好主平板，倒置贮放于4℃，原位杂交技术，直至获得杂交反应的结果。（6）裂解细菌，按本段下面所述方法，使释放的DNA结合于纤维素滤膜。核酸原位杂交可根据其检测物而分为细胞内原位杂交和组织切片内原位杂交；根据其所用探针及所要检测核酸的不同又可分为DNA-DNA，RNA-DNA，RNA-RNA杂交。但不论哪种杂交都必须经过组织细胞的固定，预杂交，杂交，冲等一系列洗步骤及自显影或酶法显色以显示杂交结果。我们在这儿介绍的是整胚原位杂交，不同于一般的在载片上对细胞和组织切片进行探针杂交及检测的原位杂交，武汉贝科新肽(图)-原位杂交技术-原位杂交由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是一家从事“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，稳健经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上，用户至上”的原则，使贝科新肽在化学试剂中赢得了客户的信任，树立了良好的企业形象。特别说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！)