癌组织原位杂交实验步骤：1.将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。2.玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O21份+蒸馏水10份混合，室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。4.暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，植物基因组原位杂交检测技术服务，混匀），37℃或室温消化3--30分钟（视标本新旧、厚薄自行调整）。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。原位杂交第二天1.1）将探针回收，放于－20C保存（通常探针可重复使用十次左右）。2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。4）置换0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。2.1）用MABT洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。2）室温下加1ml1：2：7溶液，时间为一小时。3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4C冰箱过夜。原理根据抗原反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。植物基因组原位杂交检测技术服务-科锐诺(推荐商家)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”选择武汉科锐诺生物科技有限公司，公司位于：湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼，多年来，科锐诺坚持为客户提供好的服务，联系人：王经理。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。科锐诺期待成为您的长期合作伙伴！)