原位杂交第二天1.1）将探针回收，放于－20C保存（通常探针可重复使用十次左右）。2）加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升，60℃，放置30分钟，重复一次。3）置换2XSSCT1ml，60℃，放置15分钟。4）置换0.2XSSCT1ml，60℃，放置30分钟，重复一次。2.1）用MABT洗两次，每次五分钟，放在摇床轻轻摇动。2）室温下加1ml1：2：7溶液，时间为一小时。3）按1：3000的比例在1：2：7溶液中加入酶连，4C冰箱过夜。荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization，FISH)技术基本原理与显色原位杂交相同，不同之处在于FISH是应用荧光素标记的探针与组织细胞中待测核酸反应形成杂交体，并采用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜观察信号表达。为了同时检测多个靶位，在荧光原位杂交技术的基础上发展起来一种新技术，即多彩色荧光原位杂交既要充分保留被测核酸，（特别是RNA）不被降解，又要尽可能维持原有组织或细胞的形态结构。步骤：基本与免1疫组织化学技术相似，水稻原位杂交技术服务，即组织要求新鲜和迅速投入固定液。固定液为4%多聚甲醛/0.1MPBS（PH7.0-7.6），含有1/1000DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块，固定1小时即可，较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感，如动物大脑，固定时间30-40分钟，一般不要超过1小时。取材过程中避免手指、唾液和未经RNA酶抑制处理的器具接触标本。冷冻切片以厚5~30um佳，40℃烤箱内干燥2小时后储存在-80℃超低温冰箱，在-20℃可保存２～３周，在-70℃可保存数月之久。水稻原位杂交技术服务-科锐诺生物(在线咨询)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司位于湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前科锐诺在技术合作中享有良好的声誉。科锐诺取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。科锐诺全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)