蛋白互作-武汉贝科新肽科技公司(图)
蛋白质亚细胞定位的研究方法1、融合报告基因定位法将绿色荧光蛋白(GFP)及其衍生蛋白、β-葡萄糖苷酸酶(GUS)等报告基因,与目标蛋白基因融合在一起,蛋白互作,由目标蛋白的引导信号进行亚细胞定位,对报告蛋白的光信号进行跟踪和观察,从而确定目标蛋白的定位。该方法是目前使用广泛的蛋白质亚细胞定位研究方法。2、荧光标记定位法将反应与化学光学信号相结合,通过特异性的荧光标记与目标蛋白(抗原)结合,通过荧光信号检测,确定目标蛋白的亚细胞位置。目前标记信号不局限于荧光素,还有同位素、酶、胶体金颗粒、纳米金属颗粒等。GaMYB2在洋葱表皮细胞中的瞬时表达分析:采用基因轰击的方法,用包裹质粒的金粉对洋葱表皮进行轰击,暗培养过夜后,在激光共聚焦显微镜下进行观察,从图A中可以看出对照GFP空载体在整个洋葱细胞均能看到绿色荧光,为组成型表达;从图B中发现GaMYB2-GFP的融合表达载体只能在细胞核中能看到绿色荧光,这进一步证明该蛋白不具有跨膜蛋白结构,定位在细胞核中,具有转录因子的一般特征。用水稻原生质体进行亚细胞定位时,为什么不拍摄叶绿体的自发荧光?经测验,使用水稻黄化苗制备原生质体,载体转化效率及基因表达强度较高,而黄化苗中叶绿体较少,因此水稻原生质体定位拍照时,除非与叶绿体共定位,否则不拍摄叶绿体的自发荧光。为什么要提供GFP空载的对照图片?(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。蛋白互作-武汉贝科新肽科技公司(图)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。蛋白互作-武汉贝科新肽科技公司(图)是武汉贝科新肽科技有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:夏先生。)
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