后固定：胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1MPBS（PH7.2-7.6），含有1/1000DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。原位杂交的预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次;37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。在酵母双杂交系统中，BD与X蛋白融合，AD与Y蛋白融合，如果X、Y之间形成蛋白-蛋白复合物，AD与BD会在空间上充分接近，重新构成结构域，启动报告基因的转录。拥有BD质粒的酵母可以在某一缺陷培养基上生长，拥有AD质粒的酵母菌可以在另一种缺陷培养基上生长，通过接合（mating）或共转化使酵母同时拥有AD与BD质粒。如果BD上的目的蛋白与AD上的诱饵蛋白存在相互作用，这样的酵母可以在三缺及四缺的培养基上生长，并启动β-半乳糖苷酶基因的转录。滴加FITC-TSA：滴加FITC-TSA试剂，避光室温反应5min。后TBST洗3次×10min，PBS洗1次×5min。DAPI复染核：切片滴加DAPI染液，避光孵育8min，分子病理技术服务，冲洗后滴加抗荧光淬灭封片1剂封片。镜检拍照：切片于尼康正置荧光显微镜下观察并采集图像。（紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm，发蓝光；FAM(488)绿光激发波长465-495nm，发射波长515-555nm，发绿光；CY3红光激发波长510-560，发射波长590nm，发红光。）武汉科锐诺生物(多图)-分子病理技术服务由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”选择武汉科锐诺生物科技有限公司，公司位于：湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼，多年来，科锐诺坚持为客户提供好的服务，联系人：王经理。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。科锐诺期待成为您的长期合作伙伴！)