亚细胞定位原理利用GFP、RFP等荧光蛋白具有的荧光性质和灵敏性，来示踪细胞内的蛋白。将目标蛋白与荧光蛋白的N端或者C端融合，通过瞬转或稳转，使该融合蛋白在受体材料细胞内表达，目标蛋白会牵引荧光蛋白一起定位到目标细胞器，经过激光共聚焦显微镜激光照射，慢病毒载体构建，荧光蛋白会发出荧光，通过观察荧光蛋白在细胞内显示的位置，从而可以确定目标蛋白的亚细胞定位情况，即可对蛋白质进行准确定位。禾谷菌CgRab5A的亚细胞定位研究：刘涵等人利用多片段一步法将CgRab5A自身启动子、GFP片段和CgRab5A开放阅读框（ORF）片段到pKNT载体上，转化型禾谷菌的原生质体后，通过共聚焦显微镜观察GFP-CgRab5A在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明，GFP-CgRab5A在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布，定位于早期内涵体上。水稻OsUF的亚细胞定位：丁作美等人通过得到水稻E3泛素连接酶—泛素融合蛋白（OsUF）基因的cDNA序列，并利用Gateway同源重组体系将OsUFcDNA全长重组到融合表达绿色荧光蛋白（GFP）的表达载体上，通过农杆菌介导的烟草瞬时表达系统进行亚细胞定位。结果显示，OsUF蛋白定位在细胞核。通过对洋葱细胞的亚细胞定位，可以发现洋葱中的类黄酮、多酚等物质主要分布在质膜和细胞壁中。这些物质在质膜上的分布可能与洋葱的抗病性和抗逆性有关，而在细胞壁中的分布则可能与洋葱细胞的机械强度和结构稳定性有关。此外，洋葱中的一些酶类和基因也可能在不同的亚细胞结构中发挥不同的作用。总之，亚细胞定位是研究洋葱等植物细胞中生物活性物质分布和作用的重要方法之一。通过亚细胞定位，可以更好地了解这些物质在细胞内的具体位置和作用机制，为进一步研究洋葱的营养和健康价值提供科学依据。湖北慢病毒载体构建-贝科新肽由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司为客户提供“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等业务，公司拥有“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等品牌，专注于化学试剂等行业。，在湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：夏先生。)