分子病理技术服务-武汉科锐诺生物(图)
癌组织原位杂交实验步骤:1.将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。2.玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或APES。3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O21份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。原位杂交第三天1)用1ml含10%热灭清的MABT溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,分子病理技术服务,一小时以上,后用1mlMABT溶液置换,25分钟。2)用1ml1mM左旋米睉的Stainingbuffer洗三次,每次放置五分钟。3)将胚胎转入十六孔板中,吸去stainingbuffer,加上300ulBMPurpleAPSubstrate(底物,用之前加5mM左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用PBST洗两三次后加上4%多聚甲醛固定,拍照。6)4C冰箱保存。近年来基因检测在结1核病诊断中应用越来越广泛,但主要应用于痰液等新鲜标本,在石蜡包埋组织标本中应用非常少。我们建立了利用荧光定量PCR及膜探针杂交法鉴别诊断结1核病与非结1核分枝杆1菌病的分子病理检测方法;建立了利用高分辨溶解曲线法检测1线抗结1核核1心药1物利福平及异烟肼的耐药情况的分子病理检测方法。我们在首都临床医学发展专项的资助下进行大样本临床验证。这些方法也将陆续转化为我院分子病理诊断项目。分子病理技术服务-武汉科锐诺生物(图)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是一家从事“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”的公司。自成立以来,我们坚持以“诚信为本,稳健经营”的方针,勇于参与市场的良性竞争,使“科锐诺”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上,用户至上”的原则,使科锐诺在技术合作中赢得了客户的信任,树立了良好的企业形象。特别说明:本信息的图片和资料仅供参考,欢迎联系我们索取准确的资料,谢谢!)