荧光原位杂交技（fish）原理：是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交，通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。荧光原位杂交技（fish）实验步骤：1、组织固定：组织取出洗净后立即放入固定液（DEPC水配制）中固定2-12h。2、脱水：组织固定完成后经梯度酒精脱水后浸蜡，包埋。3、切片：石蜡经切片机切片，摊片机捞片，62°烤箱烤片2h。4、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲1苯Ⅰ15min-二甲1苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min，风干，DEPC水浸泡。5、消化：根据组织固定时间长短，切片于修复液中煮沸10分钟，自然冷却。后基因笔画圈，根据不同组织不同指标特性，滴加蛋白酶K(20ug/ml)37°消化20min。纯水冲洗后PBS洗3次×5min。癌组织原位杂交实验步骤：1.将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。2.玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O21份+蒸馏水10份混合，室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。4.暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀），37℃或室温消化3--30分钟（视标本新旧、厚薄自行调整）。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精1确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。原位杂交的特点是杂交在显微镜载玻片上中期染色体标本上进行。所谓原位即指标本上DNA原位变性，在利用放1射性或非放1射性标记的已知核酸探针杂交后，水稻原位杂交技术服务，通过放1射自显影或非放1射性检测体系来检测染色体上特异DNA或RNA顺序，可用放1射性颗粒在某条染色体的区带出现的频率或荧光的强弱来确定探针的位置，从而进行准确的基因定位。水稻原位杂交技术服务-科锐诺由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念，拥有一支高素质的员工队伍，力求提供更好的产品和服务回馈社会，并欢迎广大新老客户光临惠顾，真诚合作、共创美好未来。科锐诺——您可信赖的朋友，公司地址：湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼，联系人：王经理。)