酶联免疫斑点图像分析原理酶联免疫斑点图像分析原理将细胞置于包被有特异性Antibody的96孔板中培养，在有刺激的条件下，细胞分泌的细胞因子或免疫球蛋白会被包被Antibody捕获。移除细胞后，被capture的细胞因子可进一步使用生物素标记的二抗来标识，其后再与酶标记的亲和素作用，并加入底物使其呈色，有反应作用的细胞会留下直径大小不等的stainedspots。1.加入细胞到含有（或不含）刺激物中培养；2.阳性细胞开始分泌细胞因子，细胞因子就近被包被Antibody捕获；3.移出细胞，清洗板子，加入生物素标记的检测Antibody，形成“Antibody-抗原-Antibody”夹心结构；4.为了观察膜上斑点的形成，加入酶标记的亲和素；5.加入显色底物，在酶的催化分解下，生成不可溶的色素，就近沉淀在局部的膜上形成斑点；6.斑点计数（可用bioreader自动读板仪计数），数据处理，结果分析。酶联免疫斑点技术（EnzymeLinkedImmunospotAssay，简称ELISPOT）是细胞免疫学研究中更敏感的检测方法，可以在单细胞水平对Antibody分泌细胞(ASC)及细胞因子(CK)分泌细胞进行检测，比ELISA和有限稀释法等具有更髙的灵敏性，能从20万-30万细胞中检岀1个分泌该蛋白的细胞。并且该方法能够对抗原刺激后的Livingcells进行功能性检测，酶联免疫斑点图像分析生产厂家，具有较髙的特异性、直观可信度髙，并且易操作，酶联免疫斑点图像分析多少钱，已被广泛用于分泌CK细胞检测或ASC测定中，在国内外免疫学界获得了广泛的应用。ELISPOT实验步骤淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后，BEI捕获的细胞因子与生物素标记的单抗结合，其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后，酶联免疫斑点图像分析，PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子，酶联免疫斑点图像分析厂家，通过酶联免疫斑点分析仪（ELISPOTReader）对斑点的进行自动计数和分析。T细胞的ELISpot分析应用：B细胞ELISpot分析是分析Antibody免疫反应的有力工具，并且是仅有的少数能直接聚焦于Antibody分泌细胞（ASC）的分析方法之一。这种J为灵敏的方法使研究人员能够识别样品中的ASC，并测量其总数以及那些对特定抗原分泌Antibody的数量。例如，B细胞ELISpot可以揭示血液中长期记忆B细胞的数量，这是无法用其他方法评估的。B细胞ELISpot的主要应用包括检测B细胞对感染的反应和vaccine引发的反应。北京世联博研-酶联免疫斑点图像分析厂家-酶联免疫斑点图像分析由世联博研（北京）科技有限公司提供。行路致远，砥砺前行。世联博研（北京）科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴，更矢志成为科研仪器仪表具有竞争力的企业，与您一起飞跃，共同成功!)