免疫蛋白荧光定位-武汉贝科新肽(图)
为什么不先对基因做预测,在预测的结果上直接做共定位?不同的预测网站有不同的计算方法,同一个基因在不同的预测网站也可能得出不同的定位结果。另外所有的结果都应是基于实验得到的,对于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推荐先做普通定位,免疫蛋白荧光定位,根据普通定位的结果再决定做哪种细胞器的共定位。适用于什么实验场景?(1)基因功能研究,文章里总少不了这一项。(2)研究蛋白相互作用,与酵母双杂实验结果相互验证。用水稻原生质体进行亚细胞定位时,为什么不拍摄叶绿体的自发荧光?经测验,使用水稻黄化苗制备原生质体,载体转化效率及基因表达强度较高,而黄化苗中叶绿体较少,因此水稻原生质体定位拍照时,除非与叶绿体共定位,否则不拍摄叶绿体的自发荧光。为什么要提供GFP空载的对照图片?(1)作为整个实验过程中的操作参照,可排除因实验操作而导致目的基因没有荧光信号的影响。(2)作为载体体系的参照,确认构建载体时所使用的载体是可正常表达荧光蛋白的。基因法转化洋葱表皮细胞:分别用70%乙醇和灭菌蒸馏水清洗金粉(直径为1μm),加入灭菌蒸馏水制成金粉悬浮液,取100μL放在含有1.0cm2洋葱表皮的玻璃皿中,边振荡边加入10μLpCambia2301-GaMYB2-GFP质粒,逐步加入40μL0.1mol·L-1亚精胺和100μL2.5mol·L-1CaCl2,振荡混匀。基因GDS-80轰击时氦气罐的气压为1300psi,取10μLDNA包裹好的微粒悬浮液加到基因中央,进行轰击,之后放置25℃避光过夜培养,使用ConfocalLaser激光共聚焦显微镜观察。免疫蛋白荧光定位-武汉贝科新肽(图)由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是湖北武汉,化学试剂的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在贝科新肽领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创贝科新肽更加美好的未来。)
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