
植物花芽原位杂交技术服务-科锐诺(图)
后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1MPBS(PH7.2-7.6),含有1/1000DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。原位杂交的预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次;37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。1、组织取材:组织取材应尽可能新鲜。由于组织RNA降解较快,所以新鲜组织和培养细胞在30min内固定。2、细胞组织固定目的与注意事项:(1)保持细胞结构;(2)大限度地保持细胞内DNA或RNA的水平;(3)使探针易于进入细胞或组织。常用的固定剂是多聚甲醛,与其它醛类固定剂不同,多聚甲醛不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或组织。目前,我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、PCR、荧光定量PCR、基因芯片和DNA测序技术DNA原位杂交主要用于基因定位、特异基因(如病原微生物基因)检测等;RNA原位杂交则用于基因表达检测。原位杂交技术的优点是操作简单,植物花芽原位杂交技术服务,可直接定位组织,价格低廉,信号稳定,储存方便,可做组织学评价,是目前应用较多的分子病理技术之一。植物花芽原位杂交技术服务-科锐诺(图)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是湖北武汉,技术合作的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在科锐诺领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创科锐诺更加美好的未来。)