
染色体原位杂交-原位杂交-武汉贝科新肽公司
原位杂交技术(insituhybridization)是以标记的核酸分子为探针,染色体原位杂交,在组织细胞原位检测特异核酸分子的技术。使含有特异序列、经过标记的核酸单链即探针,在适宜条件下与组织细胞中的互补核酸单链即靶核酸发生杂交,再以自显影或细胞化学方法对标记探针进行探测,从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。可以检测cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各种种属的标本,包括哺乳动物、爬行动物、菌、植物标本。也可以检测组织芯片。一.原位杂交天1.重新水化和固定1)吸取固定好的胚胎,原位杂交,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。2)置换成30%的PBST溶液,放置5分钟3)置换成PBST溶液,放置5分钟,重复一次4)置换成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟5)用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)1)用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,植物原位杂交,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。2)用PBST溶液轻洗,荧光原位杂交,在PBST中放置5分钟。3)用4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟,室温。4)用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。原位杂交技术的原理是什么?有何用途原位杂交技术的原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有性或非性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列要具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物(曾呈奎等2000)。染色体原位杂交-原位杂交-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。染色体原位杂交-原位杂交-武汉贝科新肽公司是武汉贝科新肽科技有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:夏先生。)