据国际细胞外囊泡学会（ISEV）在2014年的提议，外泌体鉴定3个标志：透射电镜（transmissionelectronmicroscope，TEM）、粒径（NanoparticleTrackingAnalysis，NTA）、蛋白标志物（WesternBlot，WB）。外泌体透射电镜TEM鉴定外泌体大小、形态，判断样本是否含有外泌体。外泌体透射电镜分辨率为0.1~0.2nm，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，可观测样本中是否存在外泌体样结构（通常为茶托型或一侧凹陷的半球形），同时可测量外泌体大小。检测平台：TecnaiTMG2SpiritBioTWIN检测结果：三张透射电镜图片，尽可能体现完整的外泌体形态（如有）检测周期：10-15个工作日外泌体分离提取方案。主要方案包括：1、差速超1速离心法；适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品；2、基于PEG沉淀原理的试剂盒法；适用于血1清、脑脊液等小体积的样品；3、超滤提取法；适用于细菌培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法，做进一步的提取。外泌体是细胞外囊泡的一种，其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似，电镜下，显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中，通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括：透射电镜（形态鉴定）、NTA检测（粒径及浓度鉴定）、WB（分子标志物）。NTA检测作为外泌体鉴定的经典方法之一，可同时反映出检测样品的浓度及粒径。质量较好，纯度较高的外泌体样品，NTA测试服务，粒径分布在30-150nm，原液浓度在10^9左右。为了保证检测质量，对每一个样品，都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日，可当天到样当天出结果。外泌体上的TNF家族蛋白不能被膜型金属蛋白酶切割，故较为稳定，同时借助膜形成三聚体，具有很强的诱导细胞凋亡的活性。而且，人们认为外泌体的转运TNF家族蛋白，与各种炎1症疾病和自身免1疫疾病的产生相关。例如，从类风1湿关1节炎患者的滑膜成纤维细胞中释放出来的外泌体上，聚集高浓度的膜结合型TNF-α，会加重类风1湿关1节炎病情。NTA测试服务-科锐诺生物科技由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司拥有很好的服务与产品，不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员，点击页面的商盟客服图标，可以直接与我们客服人员对话，愿我们今后的合作愉快！)