
植物组织RNA原位杂交技术服务-科锐诺生物(在线咨询)
原位杂交试验收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,植物组织RNA原位杂交技术服务,在4℃保存,二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗,然后换成,在-20C保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)武汉科锐诺生物科技有限公司原位杂交(insituhybridization)将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交,使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。原位杂交技术的基本原理是利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜(1)在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/LNaOH的小洼(0.75ml),使菌落面朝上,将滤膜放到小洼上,展平保鲜膜,使滤膜均匀湿润,让滤膜留于原处2-3分钟。(2)用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜,用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/LNaOH重复步骤(1)。(3)吸干滤膜,将滤膜转移到新的带有1mol/LTris·Cl(pH7.4)的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜,再重复一次该步骤。(4)吸干滤膜,把它转移到有1.5mol/LNaCl、0.5mol/LTris·Cl(pH7.4)的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜,转移到一张干的滤纸上,置于室温20-30分钟,使滤膜干燥。(5)将滤膜夹在两张干的滤纸之间,在真空烤箱中于80℃干烤2小时,固定DNA。(6)将固定在膜上的DNA与32P标记的RNA进行杂交。植物组织RNA原位杂交技术服务-科锐诺生物(在线咨询)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。科锐诺带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)