
科锐诺生物(多图)-分子病理技术服务
原位杂交是在分子生物学领域应用极为广泛的实验技术之一,分子病理技术服务,是在研究生物体发育过程中的一种极为重要的分子遗传学的研究方法。其英文名为insituhybridization,其中insitu为拉丁文,字面的意思理解就是说在其原来的天然的位置处杂交。用已标记的核酸探针与组织切片或细胞中的待测核酸中的互补序列杂交,从而对组织细胞中的核酸进行定性、定位和相对定量分析。是一种直接、简便的研究基因定位和表达的方法。基本原理--碱基互补配对原理后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1MPBS(PH7.2-7.6),含有1/1000DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。原位杂交的预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次;37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。原理根据抗原反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。科锐诺生物(多图)-分子病理技术服务由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。科锐诺生物(多图)-分子病理技术服务是武汉科锐诺生物科技有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:王经理。)