武汉贝科新肽科技公司(多图)-双分子荧光互补
蛋白质序列特征:利用改进型伪氨基酸组成法(PseAAC)、伪位置特异性得分矩阵法(PsePSSM)和三联体编码法(CT)对蛋白质序列进行特征提取,并将这三种方法得到的特征向量进行融合,以得到一个全新的蛋白质序列特征表达模型,然后输入到堆栈式降噪自编码器(SDAE)深度网络里自动学习更有效的特征表示,选用Softmax回归分类器进行亚细胞的分类预测,可有效提高蛋白质亚细胞定位预测的准确性。利用PSI-BLAST工具搜索蛋白质序列,提取位点特异性谱中的位点特异性得分矩阵作为蛋白质的一类特征,并计算4等分序列的氨基酸含量以及1~7阶二肽含量作为另外两类特征,由这三类特征一共得到蛋白质序列的12个特征向量。通过设计一个简单加权函数对各类特征向量加权处理,作为神经网络预测器的输入,可提高蛋白质亚细胞定位预测的精度。亚细胞定位的方法荧光技术荧光技术是一种常用的亚细胞定位方法,它利用标记目标蛋白质,然后使用荧光显微镜观察其位置。这种方法具有高特异性、高灵敏度和高分辨率等优点,但也可能存在交叉反应等干扰因素。绿色荧光蛋白标记绿色荧光蛋白标记是一种非侵入性的亚细胞定位方法,它可以将目标蛋白质与绿色荧光蛋白融合,从而使其在荧光显微镜下可见。这种方法具有较好的特异性和灵敏度,但需要将目标蛋白质进行基因改造,可能影响其天然状态。亚细胞定位操作步骤1、通过一些在线网站预测亚细胞定位2、亚细胞定位载体构建(1)引物设计:利用引物设计软件,根据pEGP-MCS-N1或pEGP-C1-MCS的酶切位点设计目的基因引物。(2)载体构建:将PCR产物酶切后插入pEGP-MCS-N1或pEF-C1-MCS,得到表达目的基因与EGP融合蛋白质的真核表达载体。3、细胞转染当细胞生长到对数生长期时,接种到共聚焦显微镜的玻璃底培养皿(35mmpetridish,10mmMicrowell)中,培养过夜。当细胞贴壁率达到30%~50%时,将融合绿色荧光蛋白GFP的重组载体质粒和目标细胞器质粒共转染细胞。37℃孵箱培养24~72h。4、激光扫描共聚焦显微镜观察将上述细胞分别在24、36、48、72h的时间点,双分子荧光互补,根据实验需求选择对应激发波长(常用405nm、488nm和561nm),使用共聚焦显微镜观察,采取图像。武汉贝科新肽科技公司(多图)-双分子荧光互补由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工队伍,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。贝科新肽——您可信赖的朋友,公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号,联系人:夏先生。)
武汉贝科新肽科技有限公司
姓名: 夏先生 先生
手机: 15002786799
业务 QQ: 81680037
公司地址: 湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号
电话: 027-87381761
传真: -