水稻RNA原位杂交技术服务-科锐诺(在线咨询)
原位杂交第二天1.1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,水稻RNA原位杂交技术服务,放置30分钟,重复一次。3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。2.1)用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。2)室温下加1ml1:2:7溶液,时间为一小时。3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4C冰箱过夜。染色体原位杂交实验的基本原理是利用特定标记的已知碱基序列的核酸探针,依据碱基互补配对原理,与中期染色体玻片标本中的同源DNA序列进行杂交。标记可以用放1射性同位素(3H、35S、32P),然后进行放1射自显影;也可以用非放1射性的荧光素生物素、地1高辛,再用荧光显微镜进行观察,即荧光原位杂交(fluorescentinsituhybridization,FISH)技术。意义在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位;用原位杂交技术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。水稻RNA原位杂交技术服务-科锐诺(在线咨询)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工队伍,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。科锐诺——您可信赖的朋友,公司地址:湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子A栋1楼,联系人:王经理。)
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