
荧光原位杂交-武汉贝科新肽公司
组织原位杂交(Tissueinsituhybridization),即原位杂交组织化学技术和原位杂交细胞化学技术原位杂交技术的基本原理利用核酸分子单链之间有互补的碱基顺序,通过碱基对之间非共价键的形成,出现稳定的双链区,荧光原位杂交,形成杂交的双链。1.两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA双键分子2.应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P,荧光素、生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交3.用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在与定位用原位杂交术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有很高的敏感性和特异性,可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。植物组织原位杂交是一种重要的分子生物学技术,它可以用来研究植物基因的表达和调控。该技术利用DNA探针与目标组织中的RNA或DNA结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。本文将介绍植物组织原位杂交的原理、步骤和应用。原理植物组织原位杂交的原理是利用DNA探针与目标组织中的RNA或DNA结合,从而确定目标基因的表达模式和位置。DNA探针是一段已知序列的DNA分子,可以与目标RNA或DNA的互补序列结合。在组织原位杂交中,DNA探针通常标记有荧光染料或性同位素,以便于检测。将32P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间,盛滤膜的容器应盖严,以防液体蒸发。杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×SSC和0.1%SDS溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗一次,同时应避免膜干涸。68℃用300-500ml1×SSC和0.1%SDS溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景很高或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml0.2×SSC和0.1%SDS的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。荧光原位杂交-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司为客户提供“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等业务,公司拥有“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等品牌,专注于化学试剂等行业。,在湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号的名声不错。欢迎来电垂询,联系人:夏先生。)