菌落的裂解及DNA结合于纤维素滤膜（1）在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/LNaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，将滤膜放到小洼上，展平保鲜膜，使滤膜均匀湿润，让滤膜留于原处2-3分钟。（2）用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜，用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/LNaOH重复步骤（1）。（3）吸干滤膜，将滤膜转移到新的带有1mol/LTris·Cl(pH7.4）的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜，再重复一次该步骤。（4）吸干滤膜，tunel技术服务，把它转移到有1.5mol/LNaCl、0.5mol/LTris·Cl(pH7.4）的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜，转移到一张干的滤纸上，置于室温20-30分钟，使滤膜干燥。（5）将滤膜夹在两张干的滤纸之间，在真空烤箱中于80℃干烤2小时，固定DNA。（6）将固定在膜上的DNA与32P标记的RNA进行杂交。癌组织原位杂交实验步骤：1.将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。2.玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O21份+蒸馏水10份混合，室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。4.暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶（1ml3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶，混匀），37℃或室温消化3--30分钟（视标本新旧、厚薄自行调整）。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。目前，我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、PCR、荧光定量PCR、基因芯片和DNA测序技术。显色原位杂交(chromogenicinsituhybridization，CISH)技术是分子生物学、组织化学及细胞学相结合产生的一门新兴技术，是利用核酸分子单链间碱基互补的原理，将地1高辛或生物素标记的外源核酸探针与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，结合成双链杂交分子，通过过氧化物酶或碱性磷酸酶的呈色反应将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。根据探针种类不同可分为DNA原位杂交和RNA原位杂交。tunel技术服务-武汉科锐诺由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司在技术合作这一领域倾注了诸多的热忱和热情，科锐诺一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场，衷心希望能与社会各界合作，共创成功，共创辉煌。相关业务欢迎垂询，联系人：王经理。)