
贝科新肽科技公司(图)-原位杂交试剂-原位杂交
原位杂交(Insituhybridazation)固定收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,原位杂交技术,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%多聚甲醛溶液洗,原位杂交,然后换成,在-20C保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)一.原位杂交天1.重新水化和固定1)吸取固定好的胚胎,加入50%的PBST溶液,放置5分钟。2)置换成30%的PBST溶液,放置5分钟3)置换成PBST溶液,放置5分钟,重复一次4)置换成4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟5)用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。蛋白酶处理与后固定(本实验不做此步)1)用10ul/ml的蛋白酶K在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理,5体节到24小时的胚胎处理3分钟,24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩,可以不用或者少用蛋白酶处理,发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织,以便于杂交。2)用PBST溶液轻洗,植物染色体原位杂交,在PBST中放置5分钟。3)用4%多聚甲醛的PBS溶液固定20分钟,室温。4)用PBST洗两次,每次放置五分钟,室温。在研究DNA分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、等非性物质)DNA或RNA片段作为核酸探针,与组织切片或细胞内待测核酸(RNA或DNA)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的mRNA或DNA的存在并定位贝科新肽科技公司(图)-原位杂交试剂-原位杂交由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司是湖北武汉,化学试剂的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在贝科新肽领导携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创贝科新肽更加美好的未来。)