染色体原位杂交-武汉贝科新肽公司
将32P标记的双链DNA探针于100℃加热5分钟,迅速置于冰浴中。单链探针不必变性。将探针加到杂交袋中杂交过夜。杂交期间,盛滤膜的容器应盖严,以防液体蒸发。杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×SSC和0.1%SDS溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗一次,同时应避免膜干涸。68℃用300-500ml1×SSC和0.1%SDS溶液洗膜两次,染色体原位杂交,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景很高或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml0.2×SSC和0.1%SDS的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。原位杂交第二天1.1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。2.1)用MABT洗两次,每次五分钟,放在摇床轻轻摇动。2)室温下加1ml1:2:7溶液,时间为一小时。3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加入酶连,4C冰箱过夜。多彩色荧光原位杂交技术多彩色荧光原位杂交(Multicolorfluorescenceinsituhybridization,mFISH)是在荧光原位杂交技术的基础上发展起来的一种新技术,它用几种不同颜色的荧光素单独或混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个靶位,各靶位在荧光显微镜下和照片上的颜色不同,呈现多种色彩,因而被称为多彩色荧光原位杂交。它克服了FISH技术的局限,能同时检测多个基因,在检测遗传物质的突变和染色体上基因定位等方面得到了广泛的应用染色体原位杂交-武汉贝科新肽公司由武汉贝科新肽科技有限公司提供。武汉贝科新肽科技有限公司为客户提供“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等业务,公司拥有“原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选”等品牌,专注于化学试剂等行业。,在湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号的名声不错。欢迎来电垂询,联系人:夏先生。)
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