荧光定量pcr-英瀚斯(在线咨询)-舟山pcr
分子生物学服务公司建有100平米分子实验室,配备有PCR仪、定量PCR仪、电泳仪、恒温培养箱、恒温摇床、垂直电泳仪、蛋白转印仪、蛋白发光成像仪等设备。分子组技术人员毕业于中国农业大学、华中科技大学同济医学院、浙江理工大学等高校生物医学相关,全部具有硕士研究生以上学历,熟练掌握分子生物学相关实验,荧光定量pcr,可开展多种分子生物学检测服务。分子实验室部分设备22.同样的OD用PAGE检测,EB染色为什么深浅不一?答:通常可以用EB染色的方法来判断双链DNA的量(如质粒DNA),因为EB可以嵌合到双链DNA中。而合成的单链DNA,由于碱基组成不同,形成二级结构的可能性不同,EB的染色程度也会有差异,比如Oligo(dT)等不形成二级结构,EB染色效果就非常差。所以不要用EB染色的方法来定量,而用紫外分光光度计检测。同样道理,用EB染色来照片不适合所有引物。23.引物不纯会有什么后果?答:引物不纯可能会导致:1)非特异性扩增;2)无法用预先设计在引物5′端酶切位点的酶切开,特别是没有保护碱基的引物;3)用于测序出现双峰或乱峰。解决办法重新合成或重新纯化。24.已经溶解的引物,为什么原先使用正常,而过一段时间再使用就不好了?答:如果溶解引物的水PH过低或污染了菌或核酸酶,会使引物降解。使用时没有充分解冻混合,液体不均匀也可能会造成引物加入量不准确。建议分装引物,避免反复冻溶。建议使用10mMTrispH7.5缓冲液溶解引物,因为有些蒸馏水的pH值比较低(pH4-5),舟山pcr,引物在这种条件下不稳定。还有一种可能性是引物没有问题,而是PCR使用材料特别是模板的质量与先前使用的不完全一致。25.PCR扩增不出就引物有问题吗?答:基本不是。当今发展出各色各样的PCR扩增技术,各色各样的高温聚合酶,就是来解决PCR扩增中遇到的扩不出、扩增效率低的问题。如巢式PCR就是扩增那些拷贝数很低的基因片段。有些重复片段的扩增,GC含量高的片段,非要采用特殊扩增手段才能扩增出了。引物扩增不出,fish检测,主要是下列两种情况比较常见:(1)RT-PCR。请注意,很多基因通过常规RT-PCR方法是很难扩增出来的。RT-PCR成功的关键在于RT的反应的RNA质量和目标基因在特定组织和细胞中含量。(2)从基因组中扩增。一般情况下,pcr引物设计,基因在基因组中都是单拷贝,基因组作为模板需要严格控制用量。基因组DNA过高,会影响反应体系中的Mg和pH荧光定量pcr-英瀚斯(在线咨询)-舟山pcr由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工队伍,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。英瀚斯——您可信赖的朋友,公司地址:江苏省南京市栖霞区和燕路371号东南大学国家大学科技园科创楼A301,联系人:戴经理。)