细胞实验-英瀚斯-细胞实验外包公司
关于细胞培养的常见问题:Q:细胞在培养过程中出现碎片如何处理?A:贴壁细胞在移除原培养液后,用PBS冲洗2-3遍;悬浮细胞离心移除原培养液后,加入PBS重悬,离心移除PBS;一般建议重复上述步骤2-3遍,细胞实验外包公司,用800-1000rpm离心3-5分钟。Q:细胞冻存能放在-80℃保存吗?A:长期保存的细胞应当放在液氮(-196℃)中保存,短时间(一般1周-2周)可以存放在-80℃。Q:培养瓶是用密封盖好,还是用透气盖好?A:都可以。只是在使用密封盖培养瓶时,瓶盖旋至约2/3,不要完全拧紧,预留约1/3以便细胞可以透气;有些品牌的密封盖培养瓶的瓶盖上有适合位置指示标志。Q:何谓FBS,FCS,细胞实验外包,CS,HS?A:Fetalbovineserum(FBS)和FetalCalfSerum(FCS)之间没有区别,都是指胎牛;FCS不是正规命名,尽量不使用。CalfSerum(CS)则是指小牛。HorseSerum(HS)则是指马。脂质体瞬时转染1、细胞H9C2(Hela)6孔板Hela1x10°/孔。2、转染前换上没有抗sheng素的DMEM+胎清(10%)。3、将质粒DNA(约2-4ul)2ul加入dorf管中+DMEM至50u1。4、脂质体5ul补培养基至50ul混匀静止5分钟(质粒与脂质体比例为1:2或1.5:2.5)。5、将含有脂质体的培养基与含质粒的混合总体积100ul室温放置30分钟。6、吸取混合物均匀加入每一个孔中。7、将6孔板放入培养箱中继续培养6小时后吸出培养基换上新配置的培养基DMEM6ml+胎清600u1+三抗300u1。8、培养24小时。小鼠精原gan细胞分离富集和培养成年小鼠gao丸中约有108个细胞,其中约有2×104个是精原gan细胞,仅占gao丸生精上皮细胞总数的0.02~0.03%,精原gan细胞数量太少不利于体外培养.分离和富集精原gan细胞成为精原gan细胞体外培养能否成功的前提条件.寻找分离和富集小鼠精原gan细胞有效方法.方法:出生6-8天小鼠为实验对象,先用0.25%胰酶1mMEDTA消化gao丸10min,用胎牛xue清终止消化,用一次40-um孔径的滤器过虑制成单细胞悬液,30%percoll不连续密度梯度法离心富集精原gan细胞,细胞实验,再根椐未分化精原gan细胞表面thy1.2(CD90.2)阳性CD117(c-kit)阴性特点用流式细胞仪将精原gan细胞分选出来,并在体外进行培养尝试.结果:30%percoll密度梯度离心前CD117(c-kit)阳性细胞占13.80±3.34%,细胞实验外包选哪家,CD90.2阳性细胞占28.98±4.51%,二者都阳性细胞占8.98±2.98%,CD117阴性CD90.2阳性细胞占18.36±2.67%;离心后CD117(c-kit)阳性细胞占12.37±3.34%,CD90.2阳性细胞占56.98±4.51%,二者都阳性细胞占8.20±3.98%,CD117阴性CD90.2阳性细胞占32.36±3.67%;CD117(c-kit)阳性细胞和二者都阳性细胞所占百分比前后比较差异无显著性(P>0.1),CD90.2阳性细胞和CD117阴性和CD90.2阳性细胞所占百分比前后比较差异有显著性(P<0.05);采用CD117和CD90.2作为标志分子,percoll离心后细胞悬液经FACS分选后获得细胞纯度细胞实验-英瀚斯-细胞实验外包公司由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司实力不俗,信誉可靠,在江苏南京的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。英瀚斯带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)
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