苏州3d细胞培养技术分类
细胞传代的一般操作方法是在开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全,一般主要有细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、庆大溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液等。工具有小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、—20℃冰箱等;操作步骤一般是镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可X疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,3d细胞培养技术分类,加入灭活小牛血X清10m1,庆大溶液0.3m1,7.5%碳酸氢钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。以上方法仅供参考!源自美国NASA的技术,能在体外进行的“三维细胞/组织培养系统”RCCS?(RotaryCellCultureSystem)!RCCS?的应用极广,从三维细胞培养,到组织工程和工业制药都有可能使用到该系统进行细胞的三维、动态的培养工作。该系统在国内、外被广泛应用于细胞培养相关的科学研究中,与此系统相关的众多科学文献涉及了多个研究领域。该系统还具有另一个特点,就是可以提供模拟的微重力效应下细胞培养的实验开展。RCCS旋转细胞培养系统是一款没有传统的机械搅拌装置来驱动的悬浮细胞的动态培养系统,RCCS系统配合HARV或者STLV的生物反应容器能够建立起一种没有机械搅拌装置破坏的、没有液体湍流的低剪切力培养环境。细胞悬浮于反应容器内部的培养液中并且随机地处于运动状态,可自由地生长、聚集并分化。同时,反应容器内外部通过反应容器内的氧合膜实现空气的交流,但反应容器内部的水分却能够不流出。)
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